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基础知识之生物化学7_主管药师辅导

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一五年魁网医学考试频道

  主管药师基础知识之生物化学

  (二)dna三级结构

  1.三级结构:dna在双螺旋二级结构基础上可盘曲成紧密的空间结构。dna螺旋链再盘绕形成超螺旋结构,盘绕方向与dna双螺旋方向一致为正超螺旋,与双螺旋方向相反为负超螺旋。

  2.原核生物:负超螺旋结构;真核细胞:核小体结构。

  3.染色体的基本单位是核小体。

  (三)dna的功能

  1.可作为生物遗传信息复制的模板和基因转录的模板;

  2.是生命遗传繁殖的物质基础,也是个体生命活动的基础。

  三、rna的结构与功能

  rna和蛋白质共同参与基因的表达和表达过程的调控。主要介绍三种参与蛋白质合成的rna:信使rna(mrna)、转运rna(trna)、核糖体rna(rrna)的结构与功能。

  (一)mrna

  mrna的碱基顺序,直接为蛋白质的氨基酸编码,并决定蛋白质的氨基酸顺序。

  1.功能:蛋白质合成的模板

  2.mrna的分子结构

  (1)帽:5’-末端有一个7-甲基鸟嘌呤核苷酸,称为帽。加速蛋白质翻译的起始速度,增加mrna稳定性。

  (2)尾:真核细胞mrna的3’-末端有一段长达200个核苷酸左右的多聚腺苷酸(polya),称为尾。与mrna从核向胞质转移有关。

  (3)编码区:mrna有编码区和非编码区,编码区是所有mrna分子的主要结构部分,决定蛋白质分子的一级结构(三联体密码)。非编码区与蛋白质生物合成调控有关。

  a型题:

  下列有关mrna的叙述,正确的是( )

  a.为线状单链结构,5/端有多聚腺苷酸帽子结构。

  b.可作为蛋白质合成的模板

  c.链的局部不可形成双链结构

  d.3/末端特殊结构与mrna的稳定无关

  e.5’-末端有一个7-甲基鸟嘌呤核苷酸,称为尾

  『正确答案』b

  (二)trna

  1.功能:作为各种氨基酸的转运载体,在蛋白质合成中转运氨基酸原料。

  2.trna的一级结构

  trna的一级结构都具有下述共同点:分子中 富含稀有碱基,包括双氢尿嘧啶(dhu)、假尿嘧啶(ψ,pseudouridine)和甲基化的嘌呤(mg,ma)等。trna的5’末端大多数为pg,而trna的3’-末端都是cca。

  3.trna的二级结构

  三叶草形状,一般可将其分为:

  (1)氨基酸臂:富g,包含trna的3’和5’-末端,3’-cca-oh。直接与活化的氨基酸结合,携带氨基酸。

  (2)反密码环:7个核苷酸,正中的3个核苷酸残基称为反密码子。辨认mrna上的密码子,使所携带的氨基酸正确进入多肽链的合成位点。

  (3)二氢尿嘧啶环(dhu环):8~11,含有dhu。

  (4)tψc环:7个核苷酸,有胸苷t、假尿苷ψ和胞苷c得名。

  (5)可变环:反密码区与tψc区之间,不同的trna该区变化较大。

  4.trna的三级结构

  在三叶草型二级结构的基础上,突环上未配对的碱基由于整个分子的扭曲而配成对,目前已知的trna的三级结构均为 倒l型。

  (三)rrna

  1.含量:在细胞内含量最多,约占rna总量的80%以上。

  2.功能:作为蛋白质合成的场所。

  a型题:

  下列有关rna的叙述错误的是( )

  a.主要有mrna,trna和rrna三类

  b.胞质中只有mrna和trna

  c.trna是细胞内分子量最小的一种rna

  d.rrna可与蛋白质结合

  e.rna并不全是单链结构

  『正确答案』b

  四、核酸的理化性质

  (一)核酸的紫外吸收

  在核酸分子中,由于嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键体系,因而具有独特的紫外线吸收光谱,一般在 260nm左右有最大吸收峰,可以作为核酸及其组份定性和定量测定的依据。

  (二)核酸的变性、复性与杂交

  1.核酸的变性

  (1)核酸的变性:在理化因素作用下, 核酸分子中的氢键断裂,双螺旋结构松散分开,形成无规则单链结构的过程。变性核酸将失去其部分或全部的生物活性。核酸的变性并不涉及磷酸二酯键的断裂,其一级结构(碱基顺序)保持不变。

  a型题:

  dna变性的原因是( )

  a.3’,5’磷酸二酯键的断裂

  b.二硫键的断裂

  c.互补碱基之间氢键断裂

  d.碱基甲基化修饰

  e.多核苷酸链解聚

  『正确答案』c

  『答案解析』dna变性是指在某些理化因素的作用下,互补的碱基对间的氢键断裂。

  (2)dna变性后,它的一系列性质也随之发生变化:

  ①增(高)色效应:天然状态的dna在完全变性后,紫外吸收(260nm)值升高,即增色效应。

  ②tm值: 随dna变性增加,260nm处的紫外光吸收值逐渐增加,该值达到最大值50%时的温度称为核酸的解链温度或融解温度,用tm表示。

  tm值影响因素: gc含量,gc含量越高,tm值越大;核酸分子量,核酸分子量越大,tm值也越大。

  a型题:

  dna的解链温度指的是( )

  a.a260nm达到最大值时的温度

  b.a260nm达到最大值时的50%时的温度

  c.dna开始解链时所需要的温度

  d.dna完全解链时所需要的温度

  e.a280nm达到最大值50%时的温度

  『正确答案』b

  『答案解析』dna的变性从开始解链到完全解链,是在一个相当窄的温度范围内完成的,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%时温度称为dna的解链温度。

  2.核酸的复性

  复性:变性dna在适当的条件下,两条彼此分开的单链可以重新缔合成为双螺旋结构,这一过程称为复性。dna复性后,一系列理化性质可基本恢复,生物活性也随之恢复。

  3.核酸的杂交

  杂交:是以核酸的变性和复性为基础的。不同来源的核酸变性后合并在一起进行复性。只要这些核酸分子的核苷酸序列中含有可以形成碱基互补配对的片段,彼此之间即可形成局部双链,即所谓的杂化双链。这个过程叫杂交或分子杂交。

  (三)探针

  一段已知序列的单链核苷酸用放射性核素(如 32p、35s)或生物素标记其末端或全链,可依碱基配对规律与具有互补序列的待测核酸进行杂交,以探测它们的同源程度,这段核苷酸链称为探针。

  a型题:

  1.核酸对紫外线的最大吸收峰是( )

  a.220nm

  b.240nm

  c.260nm

  d.280nm

  e.300nm

  『正确答案』c

  2.dna变性时其结构变化表现为( )

  a.磷酸二脂键断裂

  b.n-c糖苷键断裂

  c.戊糖内c-c键断裂

  d.碱基内c-c键断裂

  e.对应碱基间氢键断裂

  『正确答案』e

  3.核酸中含量相对恒定的元素是( )

  a.氧

  b.氮

  c.氢

  d.碳

  e.磷

  『正确答案』e

  b型题

  a.a-螺旋

  b.贝塔-折叠

  c.polya尾

  d.m7gpppnm

  e.双螺旋结构

  1.真核生物mrna3’-端特征( )

  『正确答案』c

  2.dna的二级结构特征( )

  『正确答案』e

  (二)酶的活性中心

  1.酶的活性中心:酶与作用物结合并发挥其催化作用的特定空间部位。

  2.必需基团:酶分子中与酶活性密切相关的化学基团。

  (1)活性中心内的必需基团

  (2)活性中心外的必需基团

  位于活性中心以外,维持酶活性中心应有的空间构象所必需。

  二、酶促反应的特点

  1.高效性;

  2.高度特异性:绝对特异性、相对特异性、立体异构特异性;

  3.不稳定性;

  4.酶活性的可调性。

  a型题:

  酶的催化高效性是因为酶( )

  a.启动热力学不能发生的反应

  b.能降低反应的活化能

  c.能升高反应的活化能

  d.可改变反应的平衡点

  e.对作用物(底物)的选择性

  『正确答案』b

  三、酶促反应动力学

  酶促反应动力学研究酶促反应速率及其影响因素。

  包括:底物浓度、酶浓度、ph、温度、激活剂、抑制剂。

  (一)底物浓度对反应速度的影响

  米-曼氏方程:

  1.km米氏常数概念:km是酶的特征性常数之一。km值只与酶的性质、酶所催化的底物的种类有关,与酶浓度无关。各种同工酶的km值也不同。

  2.意义

  ①表示酶与作用物的亲和力大小。km越大,酶与作用物的亲和力越小。

  ②限速酶催化的限速反应的km值在该连续反应中最大。

  ③米氏常数即为反应速度达到最大反应速度一半时的作用物浓度。米氏常数的单位为mol/l。

  a型题:

  关于km值的意义,错误的是( )

  a.km是酶的特性常数

  b.km值与酶的结构有关

  c.km值与酶所催化的底物有关

  d.km值等于反应速度为最大速度一半时的酶的浓度

  e.km值等于反应速度为最大速度一半时的底物浓度

  『正确答案』d

  『答案解析』km值的物理意义是:km值等于反应速度为最大速度一半时的底物浓度。

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